來(lái)源:
1973 年丹麥的 C.WFriis 在 BALB/c 近交系小鼠中發(fā)現自發(fā)性突變的無(wú)毛小鼠,該突變小鼠胸腺發(fā)育不良, 免疫 T 細胞缺失,而培育成了 BALB/c-nu;2014 年斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司從國家嚙齒類(lèi)實(shí)驗動(dòng) 物種子中心上海分中心引入培育。
特征:
用途:
常用于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、毒理學(xué)和基礎醫學(xué)和臨床醫學(xué)的研究。
(1)皮膚病學(xué)研究:皮毛結構缺陷。
(2)免疫和炎癥研究:免疫缺陷(T 細胞缺乏)胸腺研究。
(3)研究工具:癌癥研究(異種移植、荷瘤實(shí)驗,是最常用于腫瘤移植的動(dòng)物)。
生長(cháng)曲線(xiàn):
生理生化數據:
BALB/c-nu淋巴細胞分群驗證:
取 6 周齡 BALB/c 小鼠外周血,流式細胞測定其 CD4+、CD8+、T 細胞幾乎沒(méi)有,屬于T細胞免疫 缺陷鼠。
胸腺發(fā)育不全,胸腺被膜下可見(jiàn)脂肪浸潤,皮質(zhì)、髓質(zhì)界限模 糊、淋巴細胞少,間質(zhì)細胞多,脾組織結構基本正常,脾小體發(fā) 達,髓區明顯,B 淋巴細胞豐富。
基因鑒定報告
樣本信息和目的:
方法和結果:
Foxn1(forkhead box N1)基因(以前是Hfh11基因)主要表達于胸腺上皮細胞,在胸腺發(fā)育以及 T 細胞的 增殖、分化、成熟等方面發(fā)揮重要作用,其表達異??稍斐蒚細胞缺陷并引起機體免疫功能紊亂,導致相關(guān) 自身免疫性疾病及腫瘤等的發(fā)生。Foxn1 基因位于小鼠 11 號染色體上,有 12 個(gè)外顯子。
查詢(xún) Foxn1 基因的轉錄本信息進(jìn)行各外顯子序列的檢測,結果發(fā)現 Foxn1 基因有多個(gè)轉錄本,選擇轉錄本 XM_006532266.5(如圖2)為模板進(jìn)行引物設計和測序比對,轉錄本顯示有 9 個(gè)外顯子:
以 Foxn1 基因 DNA 為模板,設計 9 個(gè)外顯子的擴增測序引物(表1),并把 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行 Sanger 測序,并于報 告模板進(jìn)行比對,結果顯示 Foxn1 基因 3 號外顯子顯示出一個(gè)堿基(G)的缺失(圖 3),其他有少量由于產(chǎn)物 兩端測序質(zhì)量不好導致的序列不擬合被忽略掉。
Foxn1 基因 3 號外顯子 1bp 缺失后導致移碼突變并提前引入終止密碼子,蛋白翻譯提前終止,堿基缺失后 FOXN1蛋白預測顯示可能產(chǎn)生 300aa(圖4),在 Foxn1 蛋白 DNA 結合域上游提前終止,導致 Foxn1 基因功能
缺失。
結論:
斯貝福公司的裸鼠基因突變類(lèi)型為:11 號染色體上 Foxn1 基因 3 號外顯子 1bp(G)缺失,導致移碼突變、提 前引入終止密碼子,使蛋白翻譯提前終止。